本人从事临床TORCH血清学检验二年多，对国内检验科或妇产科的TORCH血清学检测现状有一些了解，也参加过一些卫临检中心的QA以及美国CAP的anti-toxoplasma igg质评。自已也碰到了不少问题，曾在弓形虫病感染的血清学诊断上载过跟头，因此，对弓形虫病感染的血清学诊断有一些了解，ANTI-TOXPLASMA，IGM/IGG，ELISA/金标法 KIT，国内外试剂皆不稳定，既使是FDA认可的试剂，结果也不敢保证。为了客观评价ANTI-TOXOPLASMA GONDII SEROLOGICAL RERULTS ，FDA特别在1999年提出了一个：FDA Public Health Advisory: Limitations of Toxoplasma IgM Commercial Test Kits,同时美国NCCLS了制定了：clinical use and interpretation of serological toxoplasma gondii ;proposed guideline(M36-P)。目前，国内较好的商业化的ANTI-TOXOPLASMA IGG，为珠海海泰药业的，已有国家批号，而国产的ANTI-TOXOPLASMA IGM，可能尚无质量过得去的商业化的ELISA KIT，更别说金标了。最经典参考方法的ANTI-TOXOPLASMA 检测方法是SABIN-FELDMAN DYE TEST。在美国有专门从事TOXOPLASMOSIS DIAGNOSIS REFERENCE LAB：。在美国所有其他实验室检测的TOXOPLASMA SEROLOGICAL POSITIVE RESULTS SHOULD BE SENT TO THEM TO VERIFY。
希望正在从事此类临床检验工作的同行们，互相交流，解决问题，不能解决问题也要增加认识！但愿未来的日子，我们发出的检验报告能够少一些投诉，多一些自信！
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国内试剂质量和监控应加强！
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请问elm80tree 你做TORCH检测阳性的多吗？
据说有的医院几年没有阳性的，好像做的都毫无意义．
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总的来说，还是有一些的，HSV的血清学阳性率高，就不用说了，但我们
自己发的报告心时有数，HSV血清学这东西临床意义要界定，基本上是HSV-DNA检测的辅助方法，而且不能够进行1、2型分型，目前，市场上的ANTI-HSV-1、2型 IGM分型试剂，完全是胡来，完全不顾我们检验人员的安危，至于说
ANTI-HSV-1、2型 IGG分型，虽然近年来出现的针对HSV gG-1/gG-2的单克隆抗体，从理论上进行分型有了根据，但目前只有美国的少数一二个厂家开发出
来了FDA APPROVED 的诊断试剂，如FOCUS ，DIAGNOLOGY。
CMV-IGM，每次都有一二个标本，毕竟流行病学调查的CMV先天性感染的
还是有一定比例的，另外要注意以前的流行病学调查的阳性率尽供参考，毕竟所用方法试剂等等都在变。
RV-IGM，阳性较少见，因为既往感染太普遍，有免疫力，阳性标本少见，再者RV感染的临床诊断也较易。四个项目，可能算他，给咱们的添的
麻烦最少。
TOXO-IGM，最复杂，各试剂之间阳性率差异最大，要么没阳性，要么阳性率要你感到吓人！建议先用一些灵敏度高的试剂进行筛选，阳性的标本再用特异性高的试剂进行确认。另外，据国外研究，相当一部分人群中，TOXOPLASMA GONDII感染后， TOXO-IGM在体内最长可存在36个月。因些，既使TOXO-IGM查得阳性，也不一定能肯定是急性感染。目前，又有一些用抗体亲和力高低做急性/既往感染作鉴别的。
不知道，有没有妇产科做此类项目临床研究的，或做此类项目诊断试剂研究的，提出一些经验，让俺们也分享一个。
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elm80tree
想给你加分，可惜暂无权限。
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大家都是TORCH检验方面的专家，能否谈谈你们用的是哪家试剂？感觉哪家最好啊？另外请问国内哪里有TORCH检验的参照品卖啊？谢谢！
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1、DIASORIN+TRINITY+ABBOTT，DIASORIN capture 阳性率低，特异性较高；
TRINITY的假阳性较多；ABBOTT的CUTOFF值不太适用于中国人群，可能要
上下调动；发报告时要综合考虑，平时关注一下:,,里面经常会有各大厂家如Bayer,Euroimmun,Diamedix,
Bechman:Access,Bio-Rad,DPC-immulite,DIASORIN,Roche,biomerieux-vidas,ABBOTT-
AXSYM参加QA的报告，从中可以了解到国外同行用的诊断试剂，各试剂厂家
的市场占有率，及一定程度上反应的试剂质量的好坏！我这里有几份，因为本人尚未学会上传附件，若有人需要的可留下E-MAIL，我再发给各位。大家可也上网下载，我个人觉得蛮有用的！
2、TORCH检验的参照品，国内未见有销售，有一部分参照品的研制，可能尚是正在进行的攻关项目，想想，没有参照品如何评价KIT，一日无参考物质，就一日无国产试剂合出炉！只听说TOX-IGG的，生物制品所有，后来也曾详细打听。
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俺讲讲对TORCH（产前病毒感染筛查）的印象，与同道交流！
使用Euroimmune(GERMAN)的产品，TORCH为免疫印迹法（定性），HSV-1，2有单独的ELISA-kit（定量）。
总体感觉，TORCH IgM的阳性率非常低，偶见CMV，HSV-2，弓形虫几乎未见阳性。
IgG尤以CMV（巨细胞病毒），HPV(风疹），HSV-1多见。
由于临床上认为IgM型抗体有临床意义，因此我们在判断IgM阳性时，应严格标准。
关于IgG分型的临床意义及流行病学意义，未见有人专门讨论过，或许我没见过而已！：）
TORCH没有公认的质控标准，使得血清学检验的局面十分混乱。
Euroimmune公司的产品检测IgM型抗体时，使用一种吸附剂去除风湿因子的干扰，我认为十分必要，但有的公司产品没有考虑到这一点！
但我对美国NCCLS了制定的：clinical use and interpretation of serological toxoplasma gondii ;proposed guideline(M36-P)十分感兴趣！
不知能否给出全文，以供研究！
zhoujf6@163.net--------------------------------------------------------------------------------
TORCH的检测和质控目前在国内的确有很大问题。
IgM的阳性率很低（0.1-0.5%），而且在病人体内存在时间短（2周-3月），这样很难查到阳性。而很多实验室人员用一些质量不可靠的试剂居然可以得到1-5%的IgM的阳性率，他们认为只有达到这个阳性率的试剂才是好试剂？！
IgG的阳性率除弓形体（5-20%）以外都很高（70-95%），很多实验室人员反倒觉得不正常。此外，如果IgG不做定量连续检测也没有多少意义，无非是提示说明病人曾经感染过，但现在有没有影响、对胎儿有没有影响没有指示意义。
关键问题在于国家现在还没有标准。不过目前药检所正在着手建立标准。
临检中心也有对照品，每年搞两次质控测评，但只有IgM、没有IgG的。实际上，如果不是原血清，只发1：100已稀释好的血清，质控结果并不准确。因为很多测IgM间接法试剂中在稀释液里加了如抗人IgG之类的吸附剂，处理血清的结果是不仅去除IgG，也把应该留下来的IgM也去除了，导致假阴性。而稀释好的质控品省去了用试剂稀释液的步骤，实际上不能了解实验的假阴性问题。
国内买参考品可以联系：邓生，
kirbydeng@sohu.com，13802582507
可提供一些TORCH检测临床资料。也欢迎各位一起探讨TORCH检测的发展问题。
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一、 在IgM检测实验中，为什么做了很多标本都查不出一个阳性结果？
答：作为TORCH急性感染指标，一般人群中IgM抗体阳性率较低（约0.5%~3%，不同地区、不同人群、不同时期有差异）。有些厂家的间接法试剂为去除特异性IgG和类风湿因子（RF）的干扰，在标本稀释液中加入粗制的抗人IgG以图去除掉标本中特异性IgG而达到消除干扰的目的，但往往因其中大量的杂质对待测标本的IgM也有相当大的吸附去除作用， 而将IgM阳性标本漏检，甚至根本做不出阳性结果；而另外有些厂家的捕获法试剂则为了节省原料，降低成本，人为地大大降低了抗体、抗原、酶联物的浓度，同样使得IgM检测查不出阳性结果。
二、 测IgM实验中，为什么有时候会出现非常多的阳性结果？
答：排除对特定人群检查、流行病爆发等因素，IgM抗体阳性率过高通常为试剂的特异性不够导致，结果不可信。一些试剂采用粗制抗原（例如，将细胞培养物破碎后直接当抗原进行包被）及不纯的酶联物（此类试剂通常本底较高），或没有相应措施去除特异性IgG和RF干扰，检测结果容易造成假阳性。
三、 测IgG实验中，为什么有时候会出现非常多的阳性结果？
答：当机体遭受病原体感染时，体内会产生相应的抗体（免疫球蛋白，Ig），来抵抗病原体，以保护机体功能的正常运转。一般规律是先产生IgM抗体，然后产生IgG抗体，IgM抗体滴度在达到高峰后很快开始逐渐下降至较低水平，下降后一般不易检出，而IgG抗体达到高峰后则基本稳定在一个较高的滴度且持续较长时间。因此，样品血清IgG的阳性率比同样的IgM的阳性率要高得多，有些IgG的阳性率甚至达到90%以上，以至会有在一批样品实验中很少甚至几乎没有阴性的情况出现，这都是正常的。以下是TORCH几种病原体的普通人群IgM和IgG阳性率的统计数据：弓形体IgM阳性率为0.05~1%，IgG阳性率为3~25%以上；风疹病毒IgM阳性率为0.3~1%，IgG阳性率为50~85%以上；单纯疱疹病毒1+2型IgM阳性率为0.1~1.5%，IgG阳性率为60~95%以上。
四、 为什么会出现TORCH-IgM几项同时阳性的不正常情况？
答：出现TORCH-IgM几项同时阳性的结果在多数情况下是错误的，多为标本中特异性IgG和RF干扰造成。在间接法试剂中，标本中特异性IgG和RF易形成“IgG-RF”复合物，此复合物的“IgG端”易和包被的抗原结合，而“RF端” 易和抗IgM的酶联物结合，造成假阳性结果。虽然一些间接法试剂使用了抗人IgG来消除干扰，但由于少数人群中特异性IgG和RF含量较高，这些试剂的原料不纯，且存在方法学上的缺陷，无法避免这种异常情况的发生。
五、 同一标本、同种试剂为什么会出现前后判断阴阳结果不同的情况？
答：排除人为操作因素，为所用试剂的稳定性不高、重复性差造成的。事实上，试剂盒中的酶标板的质量对实验结果影响极大。劣质的酶标板，其透光均一性和吸附性差造成孔间差有可能达到50~150%。而加样不准，如使用低质量的滴瓶或低精确度的加样器和吸头，亦可使孔间差达到30%以上。
六、 ELISA实验的标本为什么要做稀释处理？
答：在抗原抗体特异性反应时，生成结合物的量与反应物的浓度有关，只有在两者分子比例合适时才会出现最强的反应。ELISA实验中，血清标本一般进行100倍的稀释处理，一方面，降低了标本中其它因子的浓度，避免其对实验的干扰，增加试剂的特异性；另一方面，可使试剂中的抗原/抗体与标本中的抗体/抗原达到最佳反应浓度，提高试剂的灵敏度。有些试剂人为的将血清使用浓度提高，甚至要求使用原血清，同时过分降低试剂中的抗体/抗原和酶联物的浓度，以期节约生产成本，而这样一来，最佳反应模式被破坏，实验的干扰因素增多，特异性、灵敏度都会大大降低，直接导致检测结果不准。
七、 为什么说捕获法的试剂灵敏度比间接法更高？
答：优质捕获法试剂包被的是抗IgMμ链的单克隆抗体，使用了高纯度的抗原和具有特异性的抗抗原酶联物；而间接法试剂即使采用了高纯度的抗原和特异性的吸附剂，在保留IgM和去除IgG方面仍然难以达到完美的平衡，灵敏度自然不如捕获法。
八、 为什么说捕获法的试剂特异性比间接法更强？
答：由于方法学上的缺陷，间接法试剂在测IgM抗体实验中的一个严重问题就是极易受到标本中特异性IgG和RF的干扰，造成假阳性。即使采用了高纯度的抗原和特异性的吸附剂，在保留大部分IgM以保证一定的灵敏度时，不得不在去除IgG方面有所牺牲而降低特异性；而捕获法的反应模式与间接法不同，其包被的是抗IgMμ链的抗体，首先将血清中IgM抗体吸附，形成免疫复合物；接着，试剂中的抗原结合到免疫复合物上，而抗抗原酶联物再结合到抗原抗体复合物上，在反应链中的第一步就切断了与IgG-RF复合物结合的可能，从根本上避免了上述干扰问题，使结果更为准确、可靠。
九、 是否所有的捕获法试剂都比间接法试剂要好？
答：并非如此。事实上，捕获法试剂盒对原材料要求很高，有些捕获法试剂生产厂家任意降低成本，用劣质的酶标板、多克隆抗体、粗制的抗原和酶联物等试剂，随意降低工作浓度，其质量可信度令人怀疑；相反，有的间接法试剂选用了重组抗原、特制吸附剂、优质酶标板和酶标二抗（单抗）等，产品质量亦有相当的保证；此外，有临床实验室反映，某些捕获法试剂的阳性对照血清不具特异性，交叉反应现象严重，这都说明并非所有捕获法试剂都可靠。
十、 捕获法试剂阳性对照有没有“交叉反应”的情况？
答：正常情况下不存在。捕获法试剂中的阳性对照即为该种待测IgM抗体的阳性血清，相互有特异性，不存在“交叉反应”的情况。如果有此问题，则说明此试剂盒在阳性对照、抗原、酶联物中至少一个环节存在“造假”问题；在间接法试剂中，有些试剂往往用高滴度的RF血清作为阳性对照的替代物，则可见到“交叉反应”。
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1、“使用Euroimmune(GERMAN)的产品，TORCH为免疫印迹法（定性）”，我想，称为“欧盟（Euroimmune）印迹法”才对，针对这个问题，我曾特向Euroimmune请教过。
2、NCCLS的文件为受保护，只有NCCSL的会员才有，且须遵守NCCLS的规定，
不能将文件内容私自传播。目前，我们单位还未成其会员，(M36-P)，只是听
临检中心人士口传。
3、”TORCH几种病原体的普通人群IgM和IgG阳性率的统计数据：弓形体IgM阳性率为0.05~1%，IgG阳性率为3~25%以上；风疹病毒IgM阳性率为0.3~1%，IgG阳性率为50~85%以上；单纯疱疹病毒1+2型IgM阳性率为0.1~1.5%，IgG阳性率为60~95%以上。“ （希望以上内容给出来源，便于引用！）
4、建议大家，把自已手头上的有关TORCH检测的一些相关的标准化文件能够上传。我想，这不论是商业性的公司，还是我们检验科都能从中获益！
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综合以上几位的观点，我作一些总结，大家可补充，不正确地方，请诸位指正！
1.检测方法的选择
TORCH的检测方法有
1）印迹法（有两种，其一为蛋白印迹，westernblot，其二为将纯化的抗原印迹于膜上，欧蒙印迹法即为此类）
2）金标法
3）酶标法（间接法与捕获法）
仅从方法而言，方法优劣顺序如下
酶标法（捕获法）＞印迹法、酶标间接法＞金标法
定量＞定性
2.标本的前处理
TORCH中IgM的窗口期十分短，因此，仅作检测一次可能不反应问题，至少要作连续检测才能反应其抗体的产生规律，临床研究可作大规模的群体监测，可分不同的特定群体，国外的流行病学资料不能反映中国的人群。
标本的稀释度是与抗原抗体的反应曲线相关的。机体产生抗体的量线性范围应比较宽，如何定一个合适的限度值得去研究一番。
吸附剂去RF因子干扰和设计出更高特异性的抗体可解决假阳性和/或假阴性的问题
3.质控
在没有公认的质控出来之前，自已作质控吧。
没有质控的检验，不如不做（俺个人观点：P）
设计自已实验室专用的质控，需要大家讨论，我想听听大家对此有何高见？
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检查结果 意 义 危险性 处理措施
IgM +IgG + 早期感染过体内有抗体；近期复发感染或体内潜伏的病毒被激活。 高 同时采取其它检测方法进一步确诊，若近期感染指标仍旧为阳性或胎儿情况不佳，应终止妊娠。
IgM +IgG - 急性期初次感染 极高 临床上少见。处理方法与上相同。
IgM -IgG + 早期感染过，体内有抗体，有一定免疫力；无近期感染。 低 无需进一步处理。
IgM -IgG - 无感染史，体内无抗体，无免疫力。视为易感人群 无 严格监控，有条件应进行人工免疫。
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几种常见的TORCH感染实验室诊断方法比较
方法 ELISA PCR 放射免疫 免疫荧光 分子杂交 病毒培养
检测对象 抗体抗原 核酸抗原 抗体抗原 抗体抗原 核酸 病毒
诊断水平 细胞水平 分子水平 细胞水平 细胞水平 分子水平 细胞水平
灵敏度g/ml 10-7 10-19 10-8 10-7 10-10 10-8
可信度 很可信 可信 很可信 一般 可信 很可信
操作难易度 容易 容易 一般 容易 难 难
时间（小时） 1.5-2 3-4 4 4 6 70-150
投资（万元） 0.5 3-4 5-6 1-2 0.5 20-25
适用范围 早期诊断流行病学调查人群抗体水平检测教学与科研 早期诊断传染病早期普查分子生物学研究 早期诊断流行病学调查人群抗体水平检测 早期诊断流行病学调查人群抗体水平检测 早期诊断基因研究 早期诊断毒种鉴定
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一、 TORCH感染与优生优育
“TORCH”一词由Nahmias于1971年撰造的，是一组病原微生物的英文名称字头组合，其中TO代表刚地弓形体（Toxoplasma gondii），R代表风疹病毒（Rubella Virus），C代表巨细胞病毒（Cytomegalovirus），H代表单纯疱疹I型和II型病毒（Herpes Simplex Virus I and II），TORCH的英文词义为“火把、火炬”，将这几种病原微生物缩合为“TORCH”一词的目的是提示其重要意义，以期引起妇产科和儿科医生的重视。
这五种病原体感染的范围广、危害大，孕妇由于内分泌系统的改变导致机体免疫力下降，容易发生原发性感染，以前感染过的孕妇体内潜伏的病毒也容易被激活而发生复发感染。妊娠期感染不仅危害母体，往往还对胎儿和新生儿产生严重不良后果，可以导致流产、早产、死胎或胎儿生长迟缓和发育畸形，通过产道和母乳可以引起新生儿感染，如果累及神经系统，可造成不同程度的智力障碍以及各种瘫痪、失聪、失明等严重后遗症，从而影响人口素质。TORCH感染在围产医学中称之为“TORCH综合征”，已经受到全世界医学界尤其是妇产科和儿科医生的高度重视。欧美等发达国家早在七十年代就将风疹、弓形体、巨细胞病毒等检测列为孕期筛查项目，目前在我国的北京、上海、广东、山东、福建、湖南、江西等地的医疗及计划生育部门也逐步开展了孕早期TORCH检测工作，随着国家优生优育工作的深入进行，人们将更加重视对TORCH感染的检测及预防。
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二、 TORCH简介
1、 弓形体（Toxo）
弓形体是一种医学原虫，属于球虫寄生虫，它引起的弓形体病（toxoplasmpsis是一种人畜共患病，广泛流行于世界各地。人患弓形体病，可侵犯多种脏器，其临床表现因侵犯脏器不同而异，几乎涉及内、外、妇、儿、神经精神、传染病、肿瘤、眼、耳鼻喉等各个学科，并且于输血、器官移植、免疫缺陷等有密切关系。
弓形体的滋养体平均为1.5×5.0um，形态呈新月形，故名弓形体。弓形体在猫、狗等动物体内普遍存在，猫和猫科动物是其终宿主。
流行病学：各种哺乳类动物为弓形体的重要传染源，其中以猫的重要性最大，其次为猪、羊、狗、鼠等。急性期病人的尿、粪、唾液以及痰中虽可有弓形体，但因其在外界不能久存，故除孕妇可以经胎盘传染胎儿外，病人作为传染源意义不大。先天性弓形体病系通过胎盘传染，后天获得性者与吞食未煮熟的肉类或使用受卵囊污染的水及过分接触猫、狗等“宠物”等有关，最近报道也可通过输血感染。胎儿和免疫缺陷（如爱滋病患者）或免疫力低下者（如肿瘤患者、长期使用免疫抑制剂的人、孕妇）易受感染。人群弓形体感染分布于世界各地，不同国家、不同地区感染率相差悬殊。弓形体感染在我国也普遍存在，人群感染率在3~25%之间（总抗体指标）。崔君兆等报道我国15个省、市、自治区的调查结果，人群感染率为4.86%（中华医学预防杂志 1991；25（1）：56）。
临床表现：
（一） 先天性弓形体病主要临床表现：
1、 神经系统异常：神经系统病变最为多见，如脑的大、小畸形、颅缝裂开及脑积水。由于脑部受损，婴儿可出现不同程度的智力发育障碍，智商低下，甚至出现精神性躁动。先天性弓形体病精神发育障碍在存活婴儿中占90%，约70%表现为惊厥、痉挛和瘫痪。部分病儿有脑膜炎、脑炎或脑膜脑炎。个别报告可发生脑脓肿。
2、 眼部不良表现：眼部病变十分重要，可累及双眼，常侵犯脉络膜、视网膜，因而发生脉络膜视网膜炎，其发病率占先天性弓形体病的40~80%，还可引起视神经炎、视神经萎缩、虹膜睫状体炎、白内障和眼肌麻痹等。
3、 流产、早产和异常产：患弓形体病的孕妇，有30~46%能将弓形体传给胎儿。胎儿的受感染率与母体初次感染时的孕期有关。在妊娠早、中、晚期胎儿受感染率分别为17%、25%和65%。胎儿损伤程度与胎龄有很大关系，即感染发生越早，胎儿受损越严重。当感染发生在妊娠头3个月，多引起流产，也可发生死胎或生下无生活能力儿和发育缺陷儿，幸存者智力发育也受严重影响。若在妊娠中3个月感染弓形体，多出现死胎、早产和严重的脑、眼疾患。在妊娠晚期，因胎儿逐渐成熟，若此时母体受感染，则胎儿可发育正常，有些也可出现早产或出生后才发生症状。有弓形体感染的胎儿出生后可有先天性畸形，如脑积水、无脑儿、小头畸形、小眼畸形和硬、软腭裂、兔唇、无耳廓、无肛门及两性畸形等。弓形体是先天畸形的重要原因，在TORCH综合征中占重要地位。
4、 呼吸系统表现，常发生肺炎、表现发热和呼吸困难，但咳嗽及咯痰不多。
5、 其他：还可出现发热、皮疹及肝脏病变等。
（二） 后天性弓形体病的临床表现：弓形体病临床表现复杂，一般先有炎症反应，如淋巴结肿大等，急性感染的后果取决于宿主的免疫状态，如患者有免疫缺陷，则感染持续，并可引起心、脑、肺甚至全身性疾病，如脑炎、脑膜炎、脑膜脑炎、癫痫和精神异常、心肌炎、心包炎和心律不齐等。如宿主免疫功能良好，则形成隐性或潜在性感染，完整的包囊周围无病理性反应，但一旦宿主免疫功能下降，则包囊破裂，其内缓殖子扩散而引起急性感染症状。大部分人（包括孕妇）受感染后多为无症状者，但孕妇感染弓形体后可通过胎盘垂直感染胎儿，引起孕妇流产、死产，导致胎儿畸形、发育缺陷或增加妊娠综合症，母体所带的弓形体也可以感染新生儿或婴细幼儿，使其患获得性弓形体病，可使新生儿的眼、中枢神经系统、呼吸系统淋巴系统等受损。
临床诊断：在急性弓形体的免疫学诊断中，特异性IgM抗体的检测是一种重要手段。IgM抗体出现较早（病期7~8天），很快上升到一定的滴度，然后迅速下降到较低的水平，在体内一般可维持数周至数月时间，偶尔也有一年以上的。临床上如果发现高滴度的IgM抗体（阳性）多提示有近期感染，而慢性弓形体感染则以检测IgG抗体为主。感染弓形体后，首先出现的是IgM抗体，然后出现IgG抗体，IgG抗体常于感染后1~3个月逐渐达到高峰，以后渐渐下降，但可维持较长时间，在此期间若再次感染，IgG将迅速升高到4倍以上的较高水平。IgG抗体阳性，则说明曾经感染过弓形体，且有一定免疫力。若检测出极高滴度的IgG抗体，则不排除有近期感染的可能。
据最新统计结果，弓形体急性感染（IgM指标）在孕妇中的阳性率为0.05~1%，正常人群在0.05~0.3%之间；而远期感染（IgG指标）在孕妇中的阳性率为3~25%，正常人群在1~20%之间。
感染弓形体的孕妇在不同妊娠时期对胎儿影响有差别，妊娠时期越早，胎儿受感染的机会越小。而胎儿损伤程度与胎龄也有很大关系，即感染发生越早，胎儿受损越严重。弓形体感染的孕妇一般情况下可以用磺胺嘧啶（SD）、乙胺嘧啶、抗菌素治疗，疗效很好。孕期感染若胎儿情况不佳或孕妇治疗后急性感染阳性指标（IgM）末转阴，必须终止妊娠。
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2、 风疹病毒（RV）
风疹病毒属于疱疹类病毒中的披膜病毒科风疹病毒属，是引起风疹的病原体，为RNA病毒。病毒经过呼吸道传播，潜伏期约2~3周，病毒增殖后进入血流引起病毒血症。风疹的临床表现类似麻疹，但较麻疹感染症状轻，合并症少，受风疹病毒感染的成年人，症状如一般的感冒，先有上感一般症状及耳后和枕下淋巴结肿大，随后面部出现潜红色斑丘疹并迅速遍及全身。多在1~3天内消退，预后良好。人群中感染率约为95%，常被人们忽视。
1963年至1964年美国发生风疹大流行，导致10000例孕妇流产，产生20000例先天畸形患儿，这才引起世界的广泛重视。孕妇在孕期6个月内感染风疹病毒，可通过胎盘侵犯胎儿（垂直传播），除引起流产、死产外，活产者大约29%表现为“先天性风疹综合征”（CRS），即出生时体重低于2.5公斤，发育迟缓；出生后全身性器官受损，先天性心脏病，畸形，耳聋、失明等。CRS患儿最常见的是白内障等眼疾患，其次是耳聋，60%有心血管系统缺损。
调查表明，感染风疹病毒与未感染风疹病毒的妊娠妇女相比，其死产和自然流产要高2~4倍。Konon等对12985名日本孕妇的调查中发现122名孕妇在孕期感染风疹病毒，其中自然流产者为4.9%，人工流产39.9，早产0.8%，先天性风疹综合症为1.6%，正常婴儿53.3%。据统计，妊娠1个月内感染风疹病毒，婴儿先天性畸形的发生率为11~58%，2个月内为11~36%，3个月内为7~15%，4个月内为7%以下，5个月内仍旧有先天性耳聋胎儿出生，妊娠6个月以外感染风疹病毒基本没有胎儿畸形的危险。孕妇急性感染阳性率为0.2~13%，不同地区、不同季节统计结果差别较大。
据最新统计结果，风疹病毒急性感染（IgM指标）在孕妇中的阳性率为0.3~1%，正常人群在0.2~1%之间；而远期感染（IgG指标）在孕妇中的阳性率为50~85%，正常人群在50~70%之间。
专家的几点建议：
1、 根据我国育龄期妇女感染率不高的情况，应采取适当方法对少数易感的青年妇女进行保护，对婚前检查RV-IgG抗体阴性者，应逐步实行接种风疹疫苗的办法。
2、 防止疫苗病毒对胎儿的损害：尽管疫苗病毒对胎儿危害较小，但已有报道从妊娠前后误种疫苗者人工流产的胎儿组织中分离到疫苗病毒。因此必须明确规定，接种疫苗前后2个月内禁止怀孕。
3、 由于CRS患儿能长期排毒，所以对CRS患儿应予适当管理，医院中怀孕的风疹抗体阴性的医护人员应避免与CRS患儿接触。
4、 应把工作重点放在预防CRS患儿的出生上，有条件的医院应逐步开展早孕TORCH感染检查工作，其中包括风疹病毒的血清学监测。
5、 一旦风疹流行，医院应密切观察流行病学动态，做好早期孕妇的了解工作，并在思想上和物质上有所准备。
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3、 巨细胞病毒（CMV）
巨细胞病毒是一种DNA病毒，是新生儿包涵体病（CID）的病原体，其直径约200nm，为最大的动物病毒。人类巨细胞病毒感染非常普遍，初次感染大多在2岁以下，通常呈隐性感染，少数有临床症状，69~90%成人已有CMV抗体。多数人在儿童时期感染过而产生获得免疫力，但多数可长期带毒成为潜伏感染。潜伏部位常在呈唾液腺、乳腺、肾、白细胞或者其它腺体中，病毒可长期或间歇地自唾液、乳汁、尿液、精液或宫颈分泌物中排出，通过口腔、生殖道、胎盘、输血、器官或骨髓移植等多种途径传播。
广泛流行病学调查表明，世界上大多数地区进入生育年龄的妇女，约60%以上有CMV抗体，孕妇的CMV原发感染率约1~3%，出生后头一周内婴儿尿中分离到CMV（证明为先天性感染）的阳性率约为0.2~2.5%。国内情况也很类似，根据1981年中国医学科学院病毒学研究所等单位在北京市的调查研究，30岁以下怀孕26周左右的妇女血清中抗CMV的补体结合抗体阳性率为72.60（115/208），怀孕38周者的阳性率为76.84%（136/177）（以上均为北京市市内妊妇）。而30岁以下的非孕妇女和女献血员（大多数是北京市远郊农民）的阳性率则高达96.52%。上述作者们也从某些妊娠妇女的宫颈分沁物中和新生儿尿中分离到了CMV。这些材料均说明，在我国，和在世界其他国家一样CMV的感染是极为普遍的，因此，应当积极进行防治。
据最新统计结果，巨细胞病毒急性感染（IgM指标）在孕妇中的阳性率为0.3~2%，正常人群在0.1~1.5%之间；而远期感染（IgG指标）在孕妇中的阳性率为60~95%，正常人群在50~90%之间。
先天性感染：孕妇发生原发性或复发性CMV感染时，病毒可通过胎盘侵袭胎儿，引起子宫内感染。发生率为0.5%~2.5%，其中5%~10%引起临床症状。孕妇原发感染造成胎儿感染的危险性要比复发感染高，病情也更严重。初生的病儿可出现全身感染综合症，即巨细胞包涵体病（CID），体征为黄疸、肝脾肿大、血小板减少性紫癜、溶血性贫血和不同程度的神经系统损害。包括小脑畸形、脉络膜视网膜炎、神经萎缩等。严重者可导致流产或死产。部分病儿可于出生后数月至数年才出现耳聋和智力发育低下等症状。
围产期感染：隐性感染的孕妇，在妊娠后期，CMV可被激活而从泌尿道和宫颈排出。因此，在分娩时婴儿经产道亦可受到感染。
接触感染：唾液、乳汁、尿、精液和宫颈分泌物中存在CMV，通过密切接触如接吻、性交、哺乳等方式而感染。另外还可以通过输血等途径造成感染。
巨细胞病毒是引起人类先天性畸形的重要原因之一，先天性巨细胞病毒感染比先天性风疹病毒感染对社会危害更大，在已经知道的病毒中，CMV最容易引起胎儿、新生儿和婴儿的急性感染和迟发性后遗症。一般急性感染指标（IgM ）阳性的孕妇，若胎儿情况不佳，如心脏异常、胎儿腹水等应立即终止妊娠。大约有7~10.2%的孕妇会发生原发性或继发性感染。
研究还提示CMV有致癌潜能，可能与宫颈癌、结肠癌的发生有关，也有报道CMV感染与爱滋病的发生有一定关系。
预防和治疗：先天性感染对小儿威胁最大，故预防的重点应当是预防先天性感染，先天性感染主要是母亲原发性感染时母亲血中的病毒通过胎盘而感染胎儿。这种先天性感染对胎儿的损害与胎儿的月龄有关，胎龄越早受损越严重。因此，从优生学考虑，凡妊娠期间诊为CMV原发性感染者，特别是妊娠早期，必须终止妊娠。对妊娠期间诊为CMV复发或再感染者，对胎儿影响较小，可继续考虑妊娠。对宫颈分离到CMV者一般不需特别处理，因分娩时感染新生儿多不引起明显症状。有人认为宫颈局部的CMV会逆行造成先天性CMV感染，这个问题尚未得到证实。受CMV感染的小儿在一、二年内常常传播病毒，故对CMV无免疫力的孕妇（抗CMV抗体阴性者）应避免与之接触。临床曾试用碘苷、阿糖腺苷、阿糖胞苷、无环鸟苷以及干扰素治疗CMV感染，报道无明显疗效。最近应用丙氧鸟苷治疗周边性视网膜炎，可防止感染向视网膜中心扩展。丙氧鸟苷并用高滴度的抗CMV免疫球蛋白，治疗骨髓移植引起的肺炎有效。
近年国外研制成功CMV减毒疫苗在高危人群中试用，证明对肾移植引起的严重CMV疾病有一定保护作用。但关于如何排除这种活疫苗的致癌潜能问题仍未完全解决。
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4、单纯疱疹病毒（HSV）
HSV主要引起皮肤黏膜疱疹性疾病，如牙龈口腔炎、角膜结膜炎、疱疹性湿疹、宫颈炎等，也可引起三叉神经炎、小儿脑膜炎及肝炎等。HSV有两个血清型HSV-I和HSV-II，两者核苷酸序列有50%同源性。
人群中HSV感染非常普遍，感染率约为80~90%，病人和健康带毒者是传染源。传染方式很多，主要通过皮肤、粘膜的直接接触，亦可通过飞沫传染，II型主要通过性接触。病毒经口腔、呼吸道和生殖器粘膜以及破损的皮肤侵入人体。初次感染者绝大多数不显症状，最常见的临床症状是黏膜或皮肤的局部疱疹，偶尔也可产生严重甚至可死亡的全身性咸染。由于带毒者和隐性感染的广泛存在，加上传播方式很多，且无可靠的疫苗，故预防困难。
原发咸染：半岁以后的婴儿，因为来自母体的抗体消失，此时容易发生HSV-I的原发感染。HSV-I最常引起龈口炎，在牙龈、咽颊部黏膜产生成群疱疹，疱疹破裂后形成溃疡，病灶内含有大量病毒。此外，还可以引起疱疹性角膜结膜炎、皮肤疱疹性湿疹、疱疹性甲沟炎或疱疹性脑炎。HSV-II的原发感染多起于性生活，主要引起生殖器的疱疹病损。原发性生殖器疱疹，约80%由HSV-II引起，少数系HSV-I所致。
隐伏与再发感染：HSV原发感染后，机体迅速产生特异性免疫力而康复，但不能彻底消除病毒，病毒可长期潜伏于侵入部位，并沿感觉神经髓鞘上行蔓延到感觉神经节，已知HSV-I潜伏于三叉神经节和颈上神经节，HSV-II潜伏于骶神经节。当机体受到有害因素刺激或免疫功能下降时，如发热、寒冷、日晒、月经妊娠、某些细菌或病毒感染，或使用肾上腺皮质激素等，潜伏病毒可能被激活，并沿神经无轴突移行至末梢部信的上皮细胞内继续增殖，导致辞局部疱疹复发（增殖性感染）。HSV-I大多引起腰部以上部位皮肤黏膜病变，HSV-II多引起腰部以下部位及外生殖器皮肤黏膜病变（ HSV-II被检疫部门列为性病检查项目之一），两型病毒均可侵犯及内脏器官。孕妇由于内分泌系统改变和机体免疫力下降，容易发生原发性感染，有引起胎儿畸形的严重后果，一般孕妇HSV急性感染指标（IgM）为阳性的应终止妊娠。孕妇HSV急性感染率为1%左右。
先天性及初生儿感染：妊娠期妇女因HSV原发感染或潜伏的病毒被激活，病毒可经过胎盘感染胎儿，诱发流产、早产、死胎或先天性畸形。孕妇生殖器有疱疹病损者，分娩时病毒 可伟给婴儿而发生新生儿疱疹感染。
据最新统计结果，单纯疱疹病毒I型急性感染（IgM指标）在孕妇中的阳性率为0.1~0.5%，正常人群在0.05~0.5%之间；而远期感染（IgG指标）在孕妇中的阳性率为30~65%，正常人群在30~60%之间。单纯疱疹病毒II型急性感染（IgM指标）在孕妇中的阳性率为0.2~1.5%，正常人群在0.1~1%之间；而远期感染（IgG指标）在孕妇中的阳性率为60~95%，正常人群在60~90%之间。
防治原则：由于HSV在组织培养中能转化细胞，有潜在致癌危险，所以一般不宜用活疫苗或含有DNA的疫苗。如孕妇产道发生HSV感染，分娩时可给新生立即注射丙种球蛋白作应急预防。碘苷、阿糖胞苷等滴眼，疱疹性角膜炎有较好疗效。近年应用无环鸟苷（ACV）对HSV有抑制作用，ACV的毒性低，对生殖器疱疹、疱疹性脑炎、免疫减弱病人的复发性疱疹及播散性疱疹，有良好疗效，但仍不能彻底防止潜伏感染的复发。
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病原体 基本病理特征 孕妇IgG阳性率 孕妇IgM阳性率 高危致畸孕期 流产致畸率
弓形体 感冒症状，淋巴肿大，轻度黄疸，短期腹泻，关节肌肉痛。 3~25%以上 0.05~1% 妊娠各期乃至出生后数月 30%左右
风疹病毒 感冒症状，淋巴肿大，宫颈痛，弥散性红斑，丘疹。 50~85% 0.3~1% 妊娠最初三个月 20-60%
巨细胞病毒 感冒症状，肝炎状态，关节肌肉痛，神经炎，淋巴肿大，宫颈炎等。 60~95% 0.3~2% 妊娠各期乃至出生地后数月 50%
单纯疱疹病毒 感冒症状，淋巴肿大。腰部以上皮肤受损（I型）或腰部以下受损（II型） 60~95% 0.1~1.5% 末次月经到胎儿娩出 最高达80%左右
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病毒感染后特异性抗体产生的规律
以及检测IgM 抗体和IgG 抗体的意义
机体具备一定的免疫力，当机体遭受病原体感染时，体内会产生相应的抗体（免疫球蛋白，Ig），来抵抗病原体，以保护机体功能的正常运转。一般规律是先产生IgM抗体，然后产生IgG抗体，IgM抗体滴度在达到高峰后很快开始逐渐下降至较低水平，下降后一般不易检出，而IgG抗体达到高峰后则基本稳定在一个较高的滴度且持续较长时间。
检查出特异性IgM 抗体说明患者近期感染，潜伏的病毒被激活产生复发感染时亦可检出IgM抗体。查出IgG抗体说明曾经感染过，而且有一定的免疫水平。当患者发生继发感染时，IgM和IgG都能较快地上升到较高滴度，其中IgG上升极其显著（一般可上升4倍以上的水平），因此临床上若测出高滴度的IgG，则意味着再次感染。
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TORCH感染实验室诊断
选用合理的诊断方法，对孕妇进行TORCH感染产前监测，采取相应措施，可减少畸形儿等病儿出生，避免流产、死胎等现象发生。
近年来，世界上许多先进的国家已将TORCH-IgM 作为孕期常规筛查项目，目前TORCH感染的实验室诊断常采用ELISA、PCR、金标等方法（表二）。PCR具有灵敏度极高的特点，直接检测病原体基因，不能判定人群抗体水平，且容易出现假阳性问题，国家卫生部已经下文在临床上禁用；金标试剂操作简单，适合基层单位使用，大多特异性不强，灵敏度也不高，不能确诊；ELISA检测的是抗体，具有灵敏度高、特异性强的特点，常检测IgM和IgG抗体，即可判断近期感染（IgM指标），又可检测人群抗体（免疫力）水平（IgG指标），在国内外检验学界最受推崇的TORCH检测方法首推ELISA。
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ELISA间接法测TORCH IgM
间接法是检测抗体最常用的方法，它利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体，故名间接法。原理：包被好抗原的酶标板 加入经过吸附剂处理过的标本（IgM） 抗原抗体结合物 加入酶标二抗 抗原抗体和酶标二抗结合物 加入底物 显颜色反应（阳性蓝色、阴性浅色或无色） 加入终止液 （阳性黄色、阴性浅色或无色）。
间接法的优点是生产成本相对较低，只要更换不同的固相抗原，就可以用一种酶联物检测各种与抗原相应的抗体。缺点是检测IgM抗体时易受到血清中特异性IgG和RF的干扰，容易出现假阳性结果。
类风湿因子（RF）为变性IgG的自身抗体，它能与人或动物的变性IgG结合，主要成分为19S的IgM， RF在类风湿性关节炎患者体内有较高滴度表达。在ELISA间接法测IgM实验中，RF能与抗IgM的酶标抗体结合，也能与特异性IgG（特异性IgG和包被的特异性抗原结合后成变性IgG）结合，造成假阳性结果。
消除干扰的办法及问题：干扰反应模式中，标本中特异性IgG起到了举足轻重的作用，如能有效去除血清中特异性IgG，即可在相当程度是消除干扰。如深圳华森的间接法TORCH-IgM ELISA试剂盒即将“抗人IgG”（吸附剂）加入标本稀释液中，来去除血清中特异性IgG，达到降低干扰的目的。另外，将标本进行稀释处理，降低血清中特异性IgG和RF等干扰因子的浓度，也是ELISA 测IgM实验中消除干扰的一个有效手段。但是，所有的加入了吸附物质的间接法试剂，都不可避免面对的一个问题是：如何在尽可能去除IgG的同时最大程度保留IgM。因为目前所有已知试剂中应用的吸附物质在吸附IgG的同时对 IgM亦有吸附作用，只是吸附程度不同。如要尽可能去除IgG则必须降低灵敏度，如要最大程度保留IgM则会使特异性大大降低，如要在特异性和灵敏度方面达到平衡则两方面都有所牺牲，这是间接法测IgM所难以彻底解决的。
二、捕获法ELISA
血清中针对某些抗原的特异性IgM和IgG同时存在，后者会干扰IgM抗体的测定，因此测定IgM抗体多用捕获法。抗体捕获法为ELISA方法中的一种，用固相包被抗IgM（链μ）抗体和抗特异性IgM抗原“捕获”待测的IgM抗体，避免了间接ELISA在方法学上的缺陷，消除了特异性IgG和类风湿因子（RF）对实验结果的干扰，其特异性、灵敏度均有很大程度的提高。
原理：包被好抗IgM（m链）单克隆抗体的酶标板——加入标本——形成抗m链和IgM抗体结合物——加入抗原和酶联物——形成抗原抗体酶结合物——加入底物——显色反应（阳性蓝色、阴性浅色或无色）——加入终止液——显色反应（阳性黄色、阴性浅色或无色）。
优点：捕获法包被的是抗IgM（链μ）抗体，可以和血清中的IgM抗体结合，特异性抗原只和和相应的IgM抗体结合（如RV的抗原只和抗-RV的IgM体结合），特异性的酶标抗体只和相应的抗原结合，因此，捕获法的特异性更强、灵敏度更高；同时酶联物和抗原结合（不能和待测IgM抗体结合），避免了特异性IgG和RF干扰。缺点是捕获法对选材要求更高，且试剂中的抗原、酶联物等试剂具有特异性，需要用不同的抗原和酶联物来检测相应的抗体，不可相互“通用”，试剂生产成本较高。
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s-f dye test !
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近期弓形虫感染实验室诊断的review：
Jack S. Remington,1,2* Philippe Thulliez,3 and Jose G. Montoya1,2
Department of Immunology and Infectious Diseases, Research Institute, Palo Alto Medical Foundation, Palo Alto,1 Division of Infectious Diseases and Geographic Medicine, Department of Medicine, Stanford University School of Medicine, Stanford, California,2 Laboratoire de la Toxoplasmose, Institut de Puériculture, Paris, France3
（Journal of Clinical Microbiology, March 2004, p. 941-945, Vol. 42, No. 3）
INTRODUCTION
There are four groups of individuals in whom the diagnosis of toxoplasmosis is most critical: pregnant women who acquire their infection during gestation, fetuses and newborns who are congenitally infected, immunocompromised patients, and those with chorioretinitis (14, 20, 25). Although the diagnosis of patients in each of these four groups has been hampered by a number of problems, the most frequent challenge encountered by physicians the world over is how to determine if a pregnant woman acquired the acute infection during gestation. Women who acquired their infection prior to pregnancy are essentially not at risk for delivering an infected infant (unless the woman is immunosuppressed).
In the United States there is no systematic screening of pregnant women to detect seroconversion during gestation. Much of the literature is based on studies from France, where such screening is performed monthly to detect recently acquired infection. Thus, in the United States, a single serum sample from each woman is submitted for evaluation, and from this sample the physician hopes to learn if the patient has recently been infected, thereby placing the fetus at risk. The high prevalence and lifelong persistence of toxoplasma immunoglobulin G (IgG) antibodies among healthy individuals in many geographical areas preclude the use of any titer in any serologic test as reflecting recent infection. Another problem is the frequent lack of reliability when IgM, IgA, or IgE toxoplasma antibody test results are used in an attempt to discriminate between recent and more distant infection. In addition there are the vagaries associated with lack of quality control, specificity, and/or sensitivity of many commercial serologic test kits on the market. In this setting, physicians and other health care workers responsible for the care of pregnant women are confused when faced with conflicting results and disagreements about interpretations of results. This often leads to incorrect information being provided by the laboratories to the physicians as well as by the physicians to their patients.
In recent years, a major effort has been made toward improving our ability to diagnose recently acquired infection in the pregnant woman and congenital infection in the fetus and newborn. We now have a number of new methods that are proving to be of great value towards this end. Among these are the serum IgG avidity test, PCR with body fluids and tissues, and Western blots of serum from mother-baby pairs. At present, the first two methods are being widely used in Europe. Hopefully they will become more readily available in the United States as well. Although our focus here is on pregnant women and newborns, these methods are finding wide use in the other groups of patients alluded to above. Our purpose here is to review each of these methods, what is known about their proper interpretation, and their strengths and shortcomings.
AVIDITY
The IgG avidity test was developed to help discriminate between past and recently acquired infection. Results are based on the measurement of the avidity (functional affinity) of toxoplasma-specific IgG antibodies. Following an antigenic challenge, the antibodies produced usually have a low average affinity. During the course of the immune response, there is maturation of antibody affinity that increases progressively over weeks or months. Increase in IgG affinity results from an antigen-driven B-cell selection process, resulting in an increase in complementarity of the antigen-antibody-binding site. Tightness of the binding of the antibody to the antigen is established through chemical forces such as hydrogen binding or electrostatic and van der Waals interactions. In the toxoplasma IgG avidity enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), urea or another protein-denaturing agent is used to dissociate the antigen-antibody complex. The resulting titer reflects urea-resistant and total IgG and is determined using the ratios of optical densities of urea-treated and -untreated samples.
The method, originally developed by Hedman and his associates in Finland (9), is available in kit form in Europe. Commercial kits have not yet been licensed in the United States. Such licensure would more readily make available a test that would significantly lessen the likelihood of misdiagnosis. It would decrease the frequently required use of confirmatory or follow-up serologic tests, including PCR analysis of amniotic fluid; would decrease the need for spiramycin; and would remove the anxiety associated with further testing.
Depending on the method used, the avidity tests currently available are helpful primarily to rule out that a patient's infection occurred within the prior 4 to 5 months. This is most useful in pregnant women in their first months of gestation who have a positive test for both IgG and IgM toxoplasma antibodies. For example, a woman who has a high avidity test result in her first trimester did not acquire the acute infection in the preceding 3 months. Therefore, since her infection was acquired prior to gestation her fetus is essentially not at risk (the likelihood of congenital transmission as a result of an infection acquired in the weeks before or near the time of conception is extremely low, approaching zero [10, 20]). In the United States, the avidity method is particularly valuable in the common situation in which only a single serum sample, drawn during the first months of gestation, is available. In one recent study, high-avidity antibodies were demonstrated retrospectively in 17.5% of 40 women for whom spiramycin had been recommended because recently acquired infection could not be ruled out in the single serum samples available from each of them (12). Examples of the usefulness of the IgG avidity test are shown in Table 1.
Critical to proper interpretation of results in the IgG avidity test in the presence of IgM antibodies is the fact that a low-avidity result does not mean the patient had a recently acquired infection. Low-avidity results may persist for as long as 1 year. In addition, substantial numbers of patients will have borderline or equivocal results (12; J. G. Montoya, H. B. Huffman, and J. S. Remington, Abstr. 40th Annu. Meet. Infect. Dis. Soc. Am., abstr. 270, p. 92, 2002). (In one study, 40% of women who had IgG antibodies but no demonstrable IgM antibodies had borderline or low-avidity antibodies [J. G. Montoya et al., Abstr. 40th Annu. Meet. Infect. Dis. Soc. Am.].) An appropriate decision on how patients with low- or equivocal-avidity test results should be managed must be made using results of other serologic methods. For this purpose a panel of serologic tests is routinely performed at the Toxoplasma Serology Reference Laboratory of the Palo Alto Medical Foundation (>
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