作者：陈少南,叶圣章，黎伟达
【关键词】 生殖器疱疹；HSV
［摘要］ 目的：通过检测生殖器疱疹患者的单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV2)抗原及抗体，探讨HSV2抗原抗体对生殖器疱疹(GH)的临床诊断意义。方法：对性病门诊的280例现症GH患者采用ELISA方法进行HSV2抗原及抗体检测。结果：有水疱现症GH患者HSV2抗原检测阳性率为89.7%，而HSV2 IgG阳性率为66.4%，HSV2 IgM阳性率为14.5%。对初发患者：HSV2抗原检测阳性率为89.3%(140/156)；HSV2 IgG阳性率为39.7%(62/156)；HSV2 IgM阳性率为25.6%(40/156)。对复发患者：HSV2抗原检测阳性率为88.7%(110/124)；HSV2 IgG阳性率为100%(124/124)；HSV2 IgM阳性检出率为零。结论：有水疱的现症GH患者HSV2抗原检测阳性检出率较高。HSV2 IgM作为GH患者的诊断指标仍需要探讨。
［关键词］ 生殖器疱疹；HSV2抗原；HSV2 IgG；HSV2 IgM
生殖器疱疹(GH)是由单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV2)引起的一种常见性传播疾病。HSV2感染发作时的症状一般是生殖器周围出现疼痛性皮肤疱疹损害和容易复发［1］。当需要与其他生殖器溃疡性疾病如：非感染性龟头炎、宫颈炎、梅毒等进行鉴别诊断时，实验室证据就非常重要。现在临床仍以检测HSV2抗原和抗体作为主要辅助诊断指标，我们对280例GH患者的HSV2抗原及抗体检测结果进行分析探讨。
1 资料和方法
1.1 病例来源 2003年5月至2005年8月，在医院门诊部280例有新发水疱的现症GH患者，其中男170例，女110例，平均年龄36岁，最小年龄17岁，最大年龄65岁。初发患者156例，其中16例皮损不明显或结痂；复发患者124例，其中14例皮损不明显或结痂，发病时间1 d~9 d，平均3 d。
1.2 标本采集 HSV2抗原检测用消毒棉拭子取皮损疱液或组织液，HSV2 抗体(包括IgG和IgM)检测抽取静脉血，吸取血清。
1.3 方法 HSV2抗原检测采用丹麦DAKO公司生产的ELISA试剂盒，原理是双抗夹心法。操作步骤：将空白、阴性、阳性对照及患者标本200 μl加入微孔中，加入酶标记物50 μl，在37 ℃湿盒中孵育90 min，洗板4次，分别加入100 μl A、B底物液，在37 ℃湿盒中孵育30 min，加入100 μl终止液，用490 nm波长读取OD值，以阴性对照的OD值+0.15作为cutoff值。HSV2抗体检测采用美国Trinity公司生产的ELISA试剂盒，操作步骤如下：在相应微孔中加入质控液、标准及经稀释的患者标本，室温孵育60 min，洗板4次，加入酶标记物，室温孵育30 min，洗板4次，分别加入底物液，室温孵育10 min后加入终止液，结果用450 nm波长读取OD值判断，以标准OD值×矫正因子作为cutoff值。
2 结果
HSV2抗原阳性检测率为89.7%(250/280)；HSV2 IgG阳性检出率为66.4%(186/280)；HSV2 IgM阳性检出率为14.3%(40/280)。在初发患者中：HSV2抗原检测阳性率为89.3%(140/156)；HSV2 IgG阳性率为39.7%(62/156)；HSV2 IgM阳性率为25.6%(40/156)。在复发患者中：HSV2抗原检测阳性率为88.7%(110/124)；HSV2 IgG阳性率为100%(124/124)；HSV2 IgM阳性检出率为零，见表1。
表1 初发患者HSV2抗原和HSV2 IgG检测结果比较（略）
表2 初发患者HSV2抗原和HSV2 IgM检测结果比较（略）
表3 复发患者HSV2抗原和HSV2 IgG检测结果比较（略）
表4 复发患者HSV2抗原和HSV2 IgM检测结果比较（略）
3 讨论
HSV2是引起GH最常见的原因，主要通过性接触传染。由于感染后具有较高的复发率，已经成为感染率最高的性传播疾病之一［2］。目前实验室诊断方法主要有：病毒分离培养、IFA方法、PCR方法、WB方法、抗原检测以及抗体检测，其中以病毒细胞培养作为“金标准”［3］，可是由于其实验室条件要求严格，成本高，而且敏感性较低等原因，还不能广泛用于临床诊断，而检测抗原和抗体的ELISA法具有快速，特异性和敏感性高的优点，成为现阶段主要的辅助诊断指标。有文献报道各阶段GH患者HSV2、IgG、IgM总阳性检出率分别为100%和72.1%［4］,其结果与本实验有很大的差异，其原因可能是：所用的包被抗原为HSV1和HSV2复合抗原，增加试剂的敏感性；调查地区较多患者存在HSV1和HSV2混合感染的现象。本实验现症GH患者HSV2抗原的阳性检出率为89.3%，而HSV2 IgG阳性检出率为66.4%，因此对于现症GH患者HSV2抗原检测仍是较佳的方法。值得注意的是有30例皮损不明显或结痂的患者，HSV2抗原检测全部为阴性，对于这部份患者，血清抗体检测是对抗原检测很好的补充。另外在本实验中HSV2 IgM对于初发患者的阳性率也仅为25.6%,而复发患者的阳性检出率为零，因此对于早期的GH患者，与HSV抗原检测相比，HSV2 IgM阳性率明显偏低，用它作为GH患者的诊断指标，会出现很多漏诊。GH较容易复发，复发患者的HSV2 IgG阳性检出率达到100%，因此可用于证实既往HSV感染，当患者的急性期血清HSV2 IgG抗体滴度低，而恢复期血清抗体滴度增加4倍或4倍以上时才有诊断意义。HSV2 IgG检测是发现亚临床无症状HSV感染者的最可行手段，对于防止GH的性传播和母婴传播有着重要意义。HSV2 IgG ELISA诊断方法近年来有了很大的发展，但应用于临床诊断要避免扩大化，以免给患者造成不必要的精神负担。
参考文献：
［1］ 叶顺章，张木友.现代性传播疾病实验诊断技术［M］.广州：广东科技出版社，1997：82.
［2］ 宋彪，陈祥生，李文忠，等.单纯疱疹病毒2型感染血清流行病学研究进展［J］.国外医学皮肤性病学，2003，29：45.
［3］ 叶顺章.性传播疾病的实验室诊断［M］.北京:科学出版社，2001：95.
［4］ Gutierrez,Fernandez,vergara,et al.Comparison of several ELISA test for detecting the pressnce of IgG and IgMagainst herpes simplex viruses［J］.Microbios,2000,103(405):127132.
