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单纯疱疹病毒Ⅱ型潜伏相关转录体开放阅读框3的表达及其抗凋亡作用[[基金项目] 国家自然科学基金资助项目(30972666);国家自然科学基金资助项目(81071401);全军医学科学技术研究“十一五”计划资助项目(06J008)
[作者单位] 1广州军区广州总医院皮肤科 广东 广州 510010;2华南理工大学生物科学与工程学院 广东 广州 510006;3南方医科大学研究生学院 广东 广州 510015
[作者简介] 杨慧兰(1962-),女,云南昆明市人,教授,博士生导师,医学博士,主要从事疱疹病毒分子生物学研究。
[通讯作者] 杨慧兰,E-mail:
huilany@medmail.com.cn]
杨慧兰1,薛礼长1,2,樊建勇1,张发洲1,2,龙朝钦1,张玲1,3
1广州军区广州总医院皮肤科 广东 广州 510010;2华南理工大学生物科学与工程学院 广东 广州 510006;3南方医科大学研究生学院 广东 广州 510015
[摘 要]
目的 研究单纯疱疹病毒Ⅱ型 (HSV-2)潜伏相关转录体(LAT)开放读码框3(ORF3)对顺铂诱导的非洲绿猴肾细胞(Vero)凋亡的影响。方法 构建重组质粒pEGPF-ORF3,并转染Vero细胞,RT-PCR验证目的基因的表达,顺铂诱导细胞凋亡,通过荧光显微镜观察凋亡小体,Gimesa染色检测细胞核形态,MTT法检测细胞吸光值,流式细胞术分析细胞凋亡情况。结果 成功构建pEGFP-ORF3真核表达载体,并能在Vero细胞中高效表达;转染pEGFP-ORF3的细胞凋亡诱导后的形态正常,MTT 法分析吸光值与正常无显著差异差异,而显著高于空质粒组,流式细胞仪分析凋亡率显著低于空质粒组而与正常组无显著差异。结论 HSV-2 LAT ORF3片段在Vero 细胞具有抗顺铂诱导的凋亡作用。
[关键词] 单纯疱疹病毒Ⅱ型;潜伏相关转录体;开放读码框3;Vero 细胞;顺铂;抗凋亡作用