疱疹疫苗 我看不懂 [复制链接]

摘　　要:目的：构建用于治疗和预防单纯疱疹病毒性角膜炎的核酸疫苗，探讨单纯疱疹病毒l型糖蛋白B(HSV-1gpB)基因作为基因疫苗的可能性。方法：利用PCR技术从HSV-1S M44毒株基因组中扩增出编码HSV-lgpB去除N端部分信号肽序列(39bp)的基因片断(2673bp)，定向插入真核表达质粒pcDNA3载体中，构建出重组真核表达质粒pcDNA-gpB，并对其进行酶切分析、PCR鉴定及测序鉴定。结果：双酶切重组质粒pcDNA-gpB．电泳可见两条带，分别为目的基因(2700bp)和线性质粒pcDNA3(5400bp)；以重组质粒pcDNA-gpB为模板进行PCR扩增，在2700bp位置扩增出特异的产物；测序结果表明，克隆基因插入方向正确．与GenBank中登录的HSV-1F 株gpB基因序列比较．同源性达99．5％。结论：利用PCR技术从HSV—lSM44株基因组中扩增出编码HSV-1gpB去除N端部分信号肽序列(39bp)的基因片断(2673bp)，成功地构建了HSV-1基因疫苗pcDNA-gpB。